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組織培養(yǎng)配方研制
組織培養(yǎng)配方的研制是組培技術(shù)的關(guān)鍵,但受材料,經(jīng)驗等因素的影響,實際生產(chǎn)中配方研究的方法千差萬別,但總體來說還是有章可循的,簡單介紹一些常用方法,以供參考。1、配方的研制方向
1、去分化----誘導(dǎo)形成原球莖、愈傷組織、
2、再分化芽----原球莖形成植株、不定芽形成植株、胚狀體、珠莖、花芽、葉、鱗片母體組織直接產(chǎn)生小植株、無菌短枝扦插腋芽萌發(fā)
3、芽苗伸長---小苗拔高,成為幼苗。
4、再分化根--- 愈傷、莖部直接生根
激素一般配比規(guī)律Skoog和Miller等所提出的生長素和激動素比例決定根和芽分化的觀點,曾被大量的試驗結(jié)果所證明 。因此二者的濃度和比例非常重要,其合適的配比就是常說的配方。狹義的配方,如:MS +BA2+NAA0。2廣義的配方,如:B5 +BA2+NAA0.2+糖5g+活性碳10%+200C+瓊脂6g1。去分化:生長素低;細胞分裂素高
2。再分化:細胞分裂素高;生長素低
3。莖伸長:赤霉素調(diào)節(jié)4。生根:生長素高;細胞分裂素低
1.參閱外來配方:簡單實用,節(jié)省時間,較為準確,效益突出。2.原配方的改造:如蘋果棗組培快繁
原分化培養(yǎng)基:MS+6 -BA4.0+NAA0.3
篩選分化培養(yǎng)基進行試驗:以原配方BA4.0、NAA0.3為參照,設(shè)計4次重復(fù),兩兩組合,則有16種配方組合,從中篩選BA、NAA*組合。
6 -BA----2.0、3.0、4.0、6.0 mg/L
NAA-----0.05、0.1、0.3、0.5 mg/L
3.新配方的研制3.1*設(shè)計(適合因素少,水平少的試驗)正交設(shè)計
正交試驗設(shè)計法----它是以概率它是以概率論數(shù)理統(tǒng)計論數(shù)理統(tǒng)計、專業(yè)技術(shù)知識和實踐經(jīng)驗為基礎(chǔ),充分利用標準化的正交表來安排試驗方案,并對試驗結(jié)果進行計算分析,zui終達到減少試驗次數(shù),縮短試驗周期,迅速找到優(yōu)化方案的一種科學(xué)計算方法。
我國從我國從20世紀世紀50年代開始,以中國科學(xué)院數(shù)學(xué)研究所為基礎(chǔ)深入研究這門科學(xué),并應(yīng)用到工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中去,得到了廣泛推廣成績顯著。正交法之所以受到人們的關(guān)注正交法之所以受到人們的關(guān)注。